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      食品、飲料加工設(shè)備 ? 保鮮冷藏設(shè)備 ? 呋喃唑酮ELISA試劑盒

      呋喃唑酮ELISA試劑盒

      • 產(chǎn)品價(jià)格:面議
      • 所屬行業(yè):保鮮冷藏設(shè)備
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      • ***更新:2016-12-30 11:30:54
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      呋喃唑酮ELISA試劑盒詳細(xì)說(shuō)明

      一、 原理? 本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法檢測(cè)水產(chǎn)和雞肉等**樣本中的呋喃唑酮,在微孔條上預(yù)包被上偶聯(lián)抗原,利用抗原與抗體的特異性免*化學(xué)反應(yīng)的原理來(lái)進(jìn)行的,樣本中的呋喃唑酮和微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗呋喃唑酮代謝物的衍生物抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣品中的呋喃唑酮含量與樣品的吸光度值呈反比,與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)比較即可得出呋喃唑酮代謝物含量。 ? 二、 試劑盒技術(shù)指標(biāo): 試劑盒靈敏度:??0.1 ppb 樣本檢測(cè)下限: **、蜂蜜????? 0.2 ppb 魚(yú)/蝦等水產(chǎn)品**因存在一定的干擾,檢測(cè)下限為0.3 ppb 回收率: 魚(yú)/蝦水產(chǎn)**?????? 90%±15% 蜂蜜/雞肉/肝臟樣本? 80%±15% 交叉反應(yīng)率: 呋喃唑酮代謝物????? 100% 呋喃它酮代謝物???? ?0.1% 呋喃妥因代謝物???? ?0.1% 呋喃西林代謝物???? ?0.1% ? 三、試劑盒組成 1.微量測(cè)試孔:?????????? 96T/8孔 2.標(biāo)準(zhǔn)品液:??? 0 ppb? 0.1 ppb? 0.3 ppb? 0.9 ppb? 2.7 ppb? 8.1 ppb (1mL/瓶) 3.酶標(biāo)記物????? ?????????? 12 mL 4.抗體工作液??????????????? 7 mL 5.底物緩沖液??????????????? 7 mL 6.底物液??????????????????? 7 mL 7.終止液??????????????????? 7 mL 8.20倍濃縮洗滌液?????????? 50 mL?? 加蒸餾水稀釋到1000 mL。? 9.復(fù)溶液?????????????????? 50 mL  10.15.1 mg衍生化試劑 ? 四、 所用儀器、試劑 具備的儀器:? 微孔酶標(biāo)儀、打印機(jī)、均質(zhì)器 、氮?dú)獯蹈裳b置、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01 g) 微量移液器:? 單道20 μL-200 μL,100 μL-1000 μL、多道250 μL 試?????? 劑:? 甲醇、氫氧化鈉、乙酸乙酯、正己烷、濃HCl、磷酸氫二鉀、鄰硝基苯甲醛、亞硝基鐵**鉀(K2Fe(CN)5?NO?3H2O)ZnSO4?7H2O ? 五、樣本前處理步驟 樣本處理前須知 處理任何樣本時(shí),都必須注意: (a)實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時(shí)要更換吸頭。 (b)實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈,必要時(shí)可對(duì)實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行清潔,以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 樣本前處理需配制: 1.衍生化試劑 稱(chēng)15.1 mg鄰硝基苯甲醛加甲醇10 mL溶解(濃度10 mM) 2.C液:(供奶樣用)稱(chēng)12.5 g亞硝基鐵**鉀用去離子水定溶至100 mL。 ????? D液:(供奶樣用)稱(chēng)29.8 g **鋅用去離子水溶解定溶至100 mL。 3.0.1 M K2HPO4?稱(chēng)22.8 g K2HPO4?3H2O加去離子水溶解定溶至1L 4.1 M HCl取8.6 mL濃HCl加水定溶至100 mL。 5.1 M NaOH稱(chēng)取4 g NaOH加水定溶至100 mL。 樣本的處理 (a)?肉樣或魚(yú)蝦 用均質(zhì)器均質(zhì)樣本,接(d)的描述方法 (b)?奶樣 1. 取出5 mL的奶樣本到玻璃離心管中,分別加入C液和D液各250 μL。 2. 用振蕩器充分混合樣本,用恒溫離心機(jī)4000 r/min以上離心10 min(4-12 ℃)。若沒(méi)有恒溫離心機(jī),則先將樣本降溫至大約2-8 ℃,然后離心。 3. 接(d)的描述方法 (c)?蜂蜜? 1. 取1±0.05 g樣本到離心管中。 2. 加入4 mL的去離子水溶解,再加入0.5 mL 1 M HCl和100 μL衍生化試劑,充分振蕩。 3. 接(d)第2步描述方法 (d)接上面的方法 1. 取1±0.05 g的均質(zhì)樣本(肉樣/魚(yú)蝦)、牛奶的離心上清液1.1 mL(相當(dāng)1 mL奶樣),分別加入4 mL的去離子水,0.5 mL 1 M HCl和100 μL衍生化試劑,充分振蕩。 2.置于56 ℃環(huán)境中孵育(2 h)。 3.分別加入5 mL 0.1 M K2HPO4, 0.4 mL 1M NaOH和5 mL的乙酸乙酯,充分振蕩30 s; 4.在室溫下(20-25 ℃)4000 r/min以上離心10 min。 5.取出2.5 mL的乙酸乙酯到另一潔凈容器中于50 ℃氮?dú)?空氣吹干。 ??? 6.用1 mL正己烷溶解干燥物,用1 mL已稀釋好的復(fù)溶液充分混合;在室溫下(20-25 ℃)4000 r/min以上離心10 min。 7.取50 μL下層相用于分析。 樣本稀釋倍數(shù):2 ? 六、操作步驟 1. 將試劑盒從冷藏環(huán)境中取出并將所需試劑從試劑盒取出,置室溫(20-25 ℃)平衡30 min以上, 注意每種液體試劑使用前均須搖勻。 2. 按需要取出微孔條及板架,將不用的微孔板重新密封,保存于2-8℃,不要冷凍。 3. 加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50 μL /孔,然后加入抗體工作液50 μL /孔,再振蕩混勻,用封板膜蓋板,37 ℃反應(yīng)30 min。 4. 洗板4-5次,每次浸泡30 s ,拍干。 5. 加入酶標(biāo)記物100 μL /孔,用封板膜蓋板,37 ℃反應(yīng)20 min。 6. 洗板4-5次,每次浸泡30 s,拍干。 7. 顯色:每孔加入底物緩沖液50 μL,再加底物液50 μL,輕輕振蕩混勻,37 ℃環(huán)境避光顯色10 min。 8. 測(cè)定:每孔加入終止液50 μL,輕輕振蕩勻,設(shè)定酶標(biāo)儀于450 nm處(在20 min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測(cè)定吸光度值。 ? 七、結(jié)果判定 以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo),以呋喃唑酮標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ng/ml)的半對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上讀出樣本所對(duì)應(yīng)的濃度,乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中呋喃唑酮實(shí)際濃度。 ? 八、注意事項(xiàng) 1.反應(yīng)溫度低于37 ℃或試劑及樣本沒(méi)有回到室溫(20-25 ℃)會(huì)導(dǎo)致OD值偏低。 2.洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。 3.混合要均勻,洗板要徹底,否則會(huì)出現(xiàn)重復(fù)性不好的現(xiàn)象。 4.反應(yīng)終止液為2M**,避免接觸皮膚。 5.將不用的微孔板放進(jìn)自封袋重新密封, 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無(wú)色的發(fā)色劑對(duì)光敏感,因此要避免直接暴露在光線(xiàn)下。 6.不要使用過(guò)了有效日期的試劑盒,不要使用不同批號(hào)試劑盒中的試劑。 7.顯色液若有任何顏色表明變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之,0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值小于0.5時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。 ? 九、儲(chǔ)藏條件和保質(zhì)期 儲(chǔ)藏條件:試劑盒于2-8℃保存,不要冷凍。 保質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見(jiàn)包裝盒

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